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    发布日期:2020-12-30

详细介绍

 Strain ER2738

Cat No. HB13005

MATERIALS PROVIDED

Storage: A suspension of E. coli strain ER2738 that has been grown in 2×YT medium and stored as a 20% glycerol stock. XL1-Blue cells must be placed as soon as possible from the low temperature shipping container. Do not store the cells in liquid nitrogen. Once reactivation, the strain could be stored in 2×YT medium containing 20% glycerol under -20 to -80°C about 5 years.

BACKGROUND

The ER2738 strain allows blue-white color screening for recombinant plasmids and is an excellent host strain for routine cloning applications using plasmid or lambda vectors. This strain is an fhuA2 version of E. coli NM522 in which the F' can be selected for using tetracycline.

Genotype: F´proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10(TetR)/ fhuA2 glnV Δ(lac-proAB) thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5.

Antibiotic Resistance: tetracycline

Growth Media: LB or 2×YT

Growth Temperature: 37°CAerobic culture

附注信息

菌株特点
1.
缺失McrB甲基化依赖的限制系统,故可以用CG位点甲基化的DNA转化此菌种。
2.
缺失EcoK识别功能,相当于EcoK修饰和限制系统缺失,可以被Eco位点甲基化或未甲基化的DNA转化,制备非甲基化的DNA
3.
允许蓝白斑筛选,有利于转化子的快速筛选。
4.
琥珀抑制突变允许携带琥珀突变的质粒和噬菌体生长。
5.
具有四环素抗性。

6.噬菌体展示蛋白表达,可以用于M13噬菌体工作,普通的质粒克隆,能够利用蓝白斑筛选,也可以用于蛋白表达。在噬菌体展示中,可用于融合性表达重组抗体。

基因型解读

基因型

表现型

K-12

K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λe14rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因,其产物可对甲基化的CG切割。

[F′proAB lacIqZΔM15   Tn10(Tetr)]

本菌种的F因子还携带proAB lacIqZΔM15   Tn10。其中野生型的proAB可合成脯氨酸;lacIq使lacI抑制蛋白过表达,对lac启动子的抑制加强,降低背景表达;ZΔM15又叫lacZ M15,编码β-半乳糖苷酶基因ω片段,与携带α片段的质粒互补可恢复酶活性,用于蓝白斑筛选;Tn10转座子带四环素抗性。

fhuA2

铁转运受体蛋白,跟TonA协作转运铁,缺失的表现型同tonA

glnV

此菌株缺失λ原噬菌体。

Δ(lac-proAB)

染色体上的lac操纵子到proAB区域缺失,故不能利用半乳糖、不能合成脯氨酸。(此缺失被该菌种F'携带的野生型lacproAB纠正)。

Δ(hsdS-mcrB)5

hsdS缺失使细菌的EcoK系统的Eco位点识别能力缺失,甲基化修饰和限制功能均失。mcrB缺失使细菌丧失对CG中甲基化C的切割。

thi-1

不能合成硫氨(维生素B1)。

 


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